شناسایی جهش شایع و معکوس اینترون22 ژن فاکتور 8 در زنان ناقل هموفیلی a با استفاده از inverse pcr و تکنیک های تکمیلی آن

پایان نامه
چکیده

بیماری هموفیلی a یک بیماری مغلوب وابسته به کروموزوم جنسی است که با خونریزی غیرکنترل شونده مشخص می شود. ابتلا به این بیماری در اثر وجود انواع جهش در ژن عامل هشت انعقادی بروز می کند. حذف ، اضافه شدن ، مضاعف شدن و مهمترین آنها یعنی جهش معکوس ، که در حدود نیمی (45%) از بیماران مبتلا به نوع شدید هموفیل a را به خود اختصاص می دهد، را در بر می گیرد و موجبات بروز بیماری هموفیلی a با شدت و ضعف متفاوت را فراهم می آورد. در این تحقیق به منظور شناسایی جهش معکوس در اینترون 22 ژن عامل هشت، ، افراد مبتلا به هموفیلی a مورد بررسی قرار داده شدند. این بیماران به تعداد 21 نفر به مرکز درمان جامع کودکان هموفیلی ایران مراجعه کرده بودند تا در این بیماران جهش 22inv مورد شناسایی قرار گیرد. از افراد مبتلا به روش مناسب نمونه خون دریافت شد و پس از استخراج dna با استفاده از تکنیک های نوین مولکولی این جهش شناسایی گردید. ابتدا با استفاده از روش inverse pcr متداول در آزمایشگاه مرکز فوق نمونه ها مورد آنالیز قرار گرفتند ، سپس با استفاده از تکنیک real time pcr این روش برای اولین بار ارتقا و با کیفیت بهتر و سریعتری قادر به شناسائی جهش مذکور گردید . در نهایت برای رسیدن به روش آنالیز سریع ، مطمئن و قابل دسترس با ضریب اطمینان بالا از long range pcr استفاده گردید . با بهینه سازی این روش ها و تائید چند باره صحت وجود جهش در 11 بیمار از 21 هموفیل مبتلا به نوع a آن ، با فراوانی بالای جهش (52%) که خود نشان دهنده اهمیت وجود این جهش در میان بیماران هموفیل ایرانی است، نشانگر این مطلب مهم نیز می باشد که می توان در اولین اقدام برای شناسائی سریع ، دقیق و کم خرج جهش معکوس 22inv از روش long range pcr و کیت های رایج و قابل دسترس آن ( تجربه این مطالعه کیت ویژه تاکارا را پیشنهاد می کند) استفاده نمود و برای تائید نهائی در مواردی از نمونه هایی که بهر دلیل جواب روشنی نداده اند از روش بهینه و ارتقاء یافته inverse pcr استفاده نمود.

۱۵ صفحه ی اول

برای دانلود 15 صفحه اول باید عضویت طلایی داشته باشید

اگر عضو سایت هستید لطفا وارد حساب کاربری خود شوید

منابع مشابه

گزارش جهش نقطه ای جدید در ژن فاکتور انعقادی شماره 8 انسانی در فردی با هموفیلی A شدید

سابقه و هدف: هموفیلی A یک بیماری خونریزی دهنده با الگوی وراثتی مغلوب و وابسته به کرومزوم X می­باشد. شیوع آن در جهان 1 در 10 هزار نفر در بین مردان می باشد. این بیماری یک نقص وراثتی فاکتور انعقادی شماره 8 می باشد. ژن فاکتور 8 در نزدیکی انتهای بازوی بلند کروموزوم X ( Xq28 ) واقع شده و در حدود 180 کیلو باز طول دارد. این ژن دارای 26 اگزون بوده و یک زنجیره پلی پپتیدی با 2351 اسید آمینه را کدگذاری می­...

متن کامل

استفاده از مولتی پلکس PCR در شناسایی حذف های شایع ژن آلفاگلوبین در حاملین آلفا تالاسمی

Background and Aim:-thalassemia is the most common inherited disorder of hemoglobin (Hb) synthesis in the world. Alpha thalassemia most frequently results from the loss of one (- ) or both (- -) of the duplicated  genes () on chromosome 16. Carriers of deletional forms of -thalassemia (-/- /-, or --/) are clinically normal but have a mild hypochromic, microcytic anemia. C...

متن کامل

شناسایی جهش‌های ژن فاکتور IX انعقادی در بیماران هموفیلی B استان اصفهان با استفاده از روش SSCP و تعیین توالی

  چکید ه   سابقه و هدف   هموفیلی B یک بیماری وابسته به جنس مغلوب است که در اثر کاهش مقدار و یا نقص عملکرد فاکتور IX انعقادی رخ می‌دهد. ژن فاکتور IX انعقادی به طول 34 کیلو باز، دارای 8 اگزون است. جهش در نواحی مختلف ژن فاکتور IX انعقادی سبب نقص در پروتئین IX انعقادی و بیماری هموفیلی B می‌گردد.   هدف از این مطالعه تعیین جهش در ژن فاکتور IX انعقادی بیماران مبتلا به هموفیلی B در استان اصفهان و یافتن...

متن کامل

The Study of Stressful Factors in Clinical Education for Nursing Students Studying in Nursing and Midwifery College in Khorramabad

کچ هدي پ شي مز هني فده و : شزومآ لاب يني شخب ساسا ي شزومآ مهم و راتسرپ ي تسا . و هنوگ ره دوج لکشم ي شزومآ رد لاب يني ، آراک يي هدزاب و ا ني شزومآ زا شخب راچد ار لکشم م ي دنک . فده اب رضاح شهوژپ سررب ي لماوع سرتسا از ي شزومآ لاب يني رد وجشناد ناي راتسرپ ي هدکشناد راتسرپ ي و يامام ي ماـجنا داـبآ مرـخ تسا هتفرگ . شور و داوم راک : رضاح هعلاطم کي هعلاطم صوت يفي عطقم ي تسا . د...

متن کامل

The effect of cyclosporine on asymmetric antibodies and serum transforming growth factor beta1 in abortion-prone model of mice CBA/J x DBA/2

كچ ي هد فده و هقباس : ي ک ي طقس زورب للع زا اه ي ،ررکم ا لماوع تلاخد ي ژولونوم ي ک ا رد ي ن قم طققس عون ي وراد دقشاب ي س ي روپسولک ي ،ن ح لدم رد طقس شهاک بجوم ي ناو ي CBA/j×DBA/2 م ي تنآ ددرگ ي داب ي اه ي ان و راققتم TGF-β لماوع زا عت مهم يي ن گلماح تشونرس هدننک ي سررب روظنم هب رضاح هعلاطم تسا ي ات ث ي ر اس ي روپسولک ي ن م رب ي از ا ي ن تنآ عون ي داب ي س و اه ي اکوت ي ن TGF...

متن کامل

منابع من

با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید

ذخیره در منابع من قبلا به منابع من ذحیره شده

{@ msg_add @}


نوع سند: پایان نامه

وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه تربیت مدرس - دانشکده علوم پزشکی

میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com

copyright © 2015-2023